martes, 18 de diciembre de 2018

Tinción de gram

Tinción de gram

 Objetivo:

 En esta práctica vamos a realizar otro tipo de tinción diferente, que además es la más importante de todas ya que se emplea para diferenciar entre las bacterias Gran (+) y Gram (-), todo esto gracias a sus propiedades de la pared celular

 Materiales:

- Mechero Bunsen
- Portaobjetos
- Asa de platino
- Pipeta Pasteur
- Colorantes de Gram (cristal violeta, lugol, alcohol ‐ acetona, safranina )
- Agua destilada estéril
- Cristalizador, barras paralelas, frasco lavador, microscopio
- Muestra bacteriana

 Procedimiento:

 -1: Lo primero que tenemos que hacer es preparar la extensión de la muestra ( No vamos a profundizar en esta ya que ya lo hemos comentado en prácticas anteriores)
-2: Ahora que dejamos unos minutos la extensión al aire libre, para que así este se seque
-3: Después vamos a hacer la fijación de las bacterias en porta como ya vimos
-4: Por últimos haremos la coloración de la extensión, colocando los portas en las paralelas y hacemos la tinción de gram y seguiremos estos pasos;
     4.1; Cubrimos la preparación con cristal violeta, durante un minuto. Tras pasar este tiempo, lo lavamos con agua destilada
     4.2; Ponemos lugol, con un periodo de 1 min. Y volvemos a lavar con agua destilada
     4.3; Le quitamos el colorante con alcohol-acetona y lavamos con mucha agua para que no quede rastro de alcohol
     4.4; Echamos el colorante que hará de contraste echando safranina (1 min 30 seg) y fusina (2 mins)
     4.5; Tras haber hecho ya todo esto es el momento de lavar con agua destilada, secar y mirar el resultado a través del microscopio empleando aceite de inmersión

 Resultado:

 Si hemos realizado correctamente todo este procedimiento podremos apreciar la morfología de las bacteria que estamos estudiando. Además apreciamos que si usamos bacteria G(+), estas habrán cogido un color azulado; no obstante si la muestra es G(-) el color de las bacterias será morado

 Galería:






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