Tinción ácido-alcohol resistente: ziehl neelsen

Tinción ácido-alcohol resistente: ziehl neelsen

 Objetivo:

 En esta práctica vamos a determinar la ácido alcohol resistencia de las micobacterias de una muestra. Para ello vamos a emplear las técnicas ya mencionadas y otras nuevas como son someter la muestra a gases de una llama para así facilitar la tinción.

Materiales:

- Porta

- Fucsina fenicada

- Decolorante (Alcohol ácido)

- Azul de metileno

- Aceite de inmersión

- Fuente de calor

- Microorganismo (M. Phlei)

 Procedimiento:

 -1: En primer lugar, como siempre vamos a preparar el porta y la muestra que vamos a emplear, por lo que tenemos que hacer la extensión

-2: A continuación vamos a fijar la muestra en el porta

-3 : Ahora pasamos a la tinción, siguiendo los estos paso;

     3.1; En primer lugar para conseguir la tinción vamos a cubrir la preparación con fucsina fenicada, durante un minuto

     3.2; Colocamos ahora sobre las preparaciones un papel de filtro y añadimos la fucsina. Mientras tenemos que suministrar la emisión de vapores por lo que cogeremos un algodón empapado en alcohol y le prendemos fuego, colocando este debajo de los portas. Todo esto durante un total de 5 minutos

     3.3; Después vamos a lavar las preparaciones con agua, eliminando así cualquier rasto de colorante

     3.5; A continuación hacemos una decoloración con alcohol ácido (30 segundos) hasta eliminar el color rojizo

     3.6; Hacemos la tinción de contraste empleando azul de metileno con una duración de 1-2 mins.

     3.7; Por último enjuagamos los portas y secamos los portas a temperatura ambiente. Para después verlos empleando un microscopio con aceite de inmersión 

Resultado:

 Si hemos hecho bien la práctica podremos ver por el microscopio un tono azul y con las bacterias de color azul más oscuro si no son resistentes, pero las resistentes se ven de color rojo. La muestra a de ser uniforme en la extensión y con un grosor adecuado

 Galería: